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三七总皂苷的含量测定

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三七总皂苷是从三七中提取出来的,主要成分包括人参皂苷Rb1,人参皂苷Rg1,三七皂苷R1等。它具有良好的化学性质和药理作用,如抗氧化,活血化瘀,通脉活络,抗凝血等。三七是一味上好的中药材,是五加科人参属多年生草本植物,分布于云南,广西等地。它生长在温暖,湿润的环境中,以疏松且富含有机质的中性或酸性砂质土壤为主,需要有丰富的腐殖质来提供营养。为什么叫三七呢?根据《本草纲目拾遗》记载,每根茎上有7个叶子,下面生了3条根,所以称为“三七”。它的茎,叶,花,果都可以入药。

检测方法有好几种,如果单独的测三七皂苷R1,人参皂苷Rg1,Re,Rd等成分,可以选择高效液相色谱(HPLC)法,以C18的色谱柱,乙腈-水为流动相,梯度洗脱,流速1-1.5ml/min,紫外检测器,波长203nm,进样量10-20uL,实现精准定量。为了更快速的检测出总皂苷的含量,满足科学实验的要求,一般叶会采用紫外分光光度法,以标准曲线的形式计算出三七总皂苷的含量。

1.提取和净化
获取干燥的植物样本,进行粉碎,过筛,用75%的乙醇,在室温下浸提3次,合并提取液后减压蒸干。也可以用超声波辅助提取,以提高处理效率。净化过程,是通过大孔径的吸附树脂柱,先用蒸馏水冲洗杂质,后用60%乙醇洗出皂苷,收集洗出液定容,待测。
2.标准曲线
先要找个三七总皂苷的对照品,用它来稀释到适当的5-7个浓度。分别加入1ml的浓硫酸,80℃水浴1h进行显色反应呈紫红色,冷却后用甲醇定容。用紫外分光光度计203nm的波长下,测定各个浓度的吸光度值,为了准确起见,也可以多测2-3个重复,求取平均值。以浓度和对应的吸光度值数据,绘制出浓度-吸光度值的标准曲线。

3.样品测定和计算
吸取适当的样品提取液,按标准曲线的方式,对样品进行显色反应。可以用2-3个平行,以空白样为对照,在紫外分光光度计上读取吸光度值,计算出平均值。将这个数值,带入到标准曲线,是可以计算出三七总皂苷的含量的。


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